配置培养基与转组培苗

11.5上午组培移苗至培养基
①进实验楼戴鞋套，进实验室穿实验服，接触实验物品带手套
②培养基和组培苗需先经过紫外照射消毒杀菌再使用
③超净工作台内只须操作人behave:先用酒精擦手套，再用酒精棉搽拭工作区域，且尽量少说话
④培养器皿开盖后，上方不得有遮盖物
⑤镊子和剪刀:
1.在高温下灭菌
2.浸泡入培养基的少量水分里冷却
3.剪苗按照习惯操作也可(⊙o⊙)
4.在移苗完一个后浸泡如75%酒精内(灯用酒精为95%)
5.茎要带着腋芽
⑥扦插苗接好后轻拿轻放防止掉落
⑦防光周期培养室内
(培养皿上的群落移至试管长大后再移至培养基，可能是这样来多，据我的观察和猜测)
⑴一个母苗可移至三个子苗培养基里
⑵一般熟练操作一天可移200子苗
我的手机  11:57:24

11.4日上午三四节课(10.00-11.30左右)进实验室为马铃薯配MS培养基
带上手套
一筛选并摆放待用的玻璃器皿
①用途:装培养基
②完好无损
③透光性好，污染物不大
④新一代的，不用底下有四个圈的旧版本
⑤有些盖子与器皿不合口，则换另外的
⑥有些盖子上面有字，是老式的，不用
⑦盖子要盖紧


二元素
①这里是按配制一升的比例
②只是一个大致概就可以
③营养足够即可，多了浪费，因马铃薯结果需两个月，故可比平常的多一点
④1g即1mL， 不需要用天平秤
⑤用量筒量，元素已配好母液

1.大量元素 20×(倍)   50g
2.微量元素 
3.苷氨酸
4.维生素
 5.Fe盐  
6.肌醇  第2-6个都是200×(倍)    各加5g，按照前后顺序加
注:×(倍的意思是浓缩)

以上为液体
以下三个为固体粉末
7.蔗糖 含量8% 一升加八十克
8.凝胶 含量0.8% 一升加八克
9.活性炭粉 1.2-1.3g 作用:吸附苗成长过程中的代谢物


三流程步骤
①容器用之前和之后都洗净
②全程边加边搅拌(最好单门一个人来做)
1.摆好玻璃器皿
2.大杯子加三分之一水(以配制3L培养基溶液举例，则加1-2L即可，保证最后定容至3L)
3.加大量元素3*50=150g即用大量桶量取150ml
4.加微量元素3*5=15g即用小量桶倒15ml
5.维生素，苷氨酸，Fe盐，肌醇 操作相同(加过的把溶液瓶往后推一点)
注:这个可能因记忆错误，顺序有所不对。
6.称量蔗糖80*3=240g，去皮，少量多次加，尽量多一点点，因为很难正好达到240.00g(这个最好提前称量好，或者第二个人来做)，加水至3L,加入蔗糖并搅拌使其完全溶解
7.称量凝胶:8*3=24g,同上，用另外一个器皿装
8.调节PH,加NaOH少许(一般来说一次即可调好)，调制5.90-6.00之间，左手将测量柱插入溶液，右手缓慢搅拌，第三个人慢加半滴至一滴碱，(如果超过6.00，则滴入盐酸调节)
9.将所有液体倒入干净锅内，全程持续搅拌，防止蔗糖干锅，加热煮沸，第一次沸腾时加入凝胶，搅拌直到第三次沸腾
10.倒出，可选(因加入活性炭后导致培养基变黑色，看不到根部，则留另一部分不加，以便观察根部生长情况)，加活性炭，1.4*3=5.2g
11.趁热倒入玻璃器皿内，至盖住器皿底部刚好超过一点即可
12.盖上盖子，不能再摇动，其自会凝固
13.湿热灭菌法，一个半小时，冷却后取出

这是今天去培养室看的苗株。

＜完＞