SRF答辩

各位老师，各位同学们，大家下午好！ 我是园艺1501班的梁镇，此次初审项目汇报人，答辩的SRF题目为stABI1和stABF在马铃薯ABA信号调控及抗逆胁迫中的功能初步探究 。

这是我们的指导老师和小组成员，我们都来自园艺1501班。

这是我们的四点立项依据。
由面及点，我们先从马铃薯的重要性说起。
马铃薯属于茄科茄属一年生草本植物，营养成分全面，是仅次于水稻、小麦、玉米的第四大粮食作物，粮菜兼用，在全球范围内是相当重要的粮食作物。
它产量高且稳定，产业链长，又因为比较耐旱、耐寒、所以适应性广，受到全世界的高度重视， 其各种加工产品在全球经济贸易中占了相当大的比重。

而作为典型的温带作物，马铃薯对水分亏缺非常敏感，而其产区主要位于降雨量少的地区，由此经常影响着它的生长和发育。
图示为种植区马铃薯植株受盐和干旱胁迫的生长状态。

ABA,即脱落酸的英文缩写，它是一种重要的植物激素，作为调控网络中重要的环节在植物应对干旱、盐碱胁迫中具有重要作用。

最近研究发现在拟南芥等其他植物中ABA响应的分子基础组成主要是ABA受体、PP2Cs、SnRK2s和ABFs。在有ABA参与的情况下，它与受体PYR/PYL/RCARs结合抑制PP2C的活性，释放下游SnRK2s的激酶活性，导致其下游的转录因子ABFs磷酸化从而调控ABA基因表达。

但目前还不确定在马铃薯中都表达机理是否相同。

据此，本项目拟研究马铃薯ABA中的stABI1和stABF这两个基因，是否参与了ABA信号通路，并初步探究其在ABA信号通路及抗盐和干旱胁迫中的功能。

我们的研究基础是已经筛选获得了马铃薯stABI1和stABF的干涉株系，并检测出其干涉效率。

1.分别取马铃薯不同的组织器官进行RNA抽提和cDNA的合成，利用荧光定量qRT-PCR分析StABI1和StABF的在不同组织和器官中的表达模式。对马铃薯组培苗进行不同处理（脱落酸、高盐以及干旱），并对不同时间点进行取样（0h, 4h, 8h, 12h, 24h）,分析StABI1和StABF的在响应ABA及高盐和干旱时的表达模式。

2.利用已获得的StABI1和StABF干涉株系，已非转基因野生型为对照，分别对其组培苗进行ABA和高盐以及干旱胁迫处理。鉴定不同的转基因株系与非转基因对照间的ABA敏感性和抗逆性差异。对于组培苗鉴定的差异表型可以进一步在田间进行鉴定

3.利用原核表达体系对StABI1进行体外表达和磷酸酶活性测定。利用酵母单杂交对StABF进行转录活性和DNA结合活性进行测定。

结尾:我的汇报（当时口误说成演讲了....)完毕，谢谢大家的聆听，希望老师们能够提出一些建议。

两个问题提问：

只有一位女老师问的

第一个是”测量叶绿素ROS等“的这个"等"是.....
她话没说完，但明显是疑惑为什么这个相关指标没有全部列出来

（我打断了........）

回答:这只是一个辅助观测指标，主要的还是研究内容里面的(我回放的研究内容的那一页PPT)表达模式，表型，和活性测定，测量叶绿素等只是为了更加丰富测量内容，增加实验可信度。

另一个问题是你们之前有做过相关的么？
（这基本是一个通用问题，前面五个人问了三四次。）
我的回答是，有，而且我们即将要做的是进行培养基的配置，然后是组培苗培养，练练手，再把干涉苗移栽进去

【完】